一、概述
　　注射液中不溶性微粒的检查方法是指在澄明度检查合格后，用以检查静脉滴注用注射液（100ml以上）中的不溶性微粒。不溶性微粒是指除气泡外，可流动的，随机存在于液体制剂包括无菌固体所配制的溶液中的异物。来源：①原辅料中引入；②生产设备（滤器、管道等）引入；③生产环境空气中悬浮的尘埃或纤维、煤烟等。不溶性微粒的存在直接关系到药品质量和人民身体的健康，其危害有：①小的微粒可引起局部循环障碍，堵塞毛细血管、水肿、静脉炎；②较大的微粒可以引起血栓；③较多的微粒侵入组织形成肉芽，更为严重的可危及人的生命。所以各国药典均对不溶性微粒有非常明显的限度规定，不溶性微粒的检查方法也从单一的显微镜计数法发展到光散射法，电阻法（库尔特计数法）和光阻法。中国药典在2000年版之前均采用显微镜计数法作为不溶性微粒检查的法定方法。由于光阻法具有操作简单，适用范围广，自动化性能强等优点，中国药典2000年版已在现有的显微镜计数法检查不溶性微粒的基础上增加了光阻法。
　　二、不溶性微粒的检查方法
　　1中国药典2000年版未收载的方法：
　　①光散射法：
　　原理：当有微粒通过时，形成正（光）脉冲
　　优缺点：a当用可见光源时，测量微粒经在01～4μm范围时，散射光与粒径呈线性关系；当用激光光源时，微粒粒径下限至001～005μm，故适用于小颗粒，低速度的微粒检测。
　　b测量结果受入射光波长，微粒折光系数（形状，粗糙度）影响，重现性差，用标准粒子标定后，结果也有偏差。
　　c当采用激光光源时，光源寿命短约几百小时～1千小时，而用白炽灯光源寿命可达上万小时。
　　②电阻法
　　原理：当不溶性微粒体积远远小于小孔管孔径时，传感器输出脉冲幅度与微粒体积成正比，即与微粒直径的立方成正比。
　　优缺点：a由于被测溶液必须导电''''否则必须加入导电溶液''''易造成污染。b结构简单，价格便宜：药典会不禁止它使用，只用于制药生产过程中不溶性微粒检测（内控）。但有争议时，不能以此为依据。c检测结果不受微粒透明度影响（可检测乳剂，胶体溶液，脂肪乳等不适用于光阻法的溶液，仅作质量内控），但受微粒导电性影响。
　　2中国药典2000年版已收载的方法
①显微计数法:借助于显微镜''''目测计数。
　　优缺点：成本低，无需贵重仪器，但操作麻烦费时，受人为因素，环境影响误差很大。
　　②光阻法：原理：当液体中的微粒通过一窄小的检测区时，与液体流向垂直的入射光，由于被不溶性微粒所阻挡，从而使传感器输出的信号变化，这种变化与微粒的截面积成正比。
　　优缺点：操作简单，适用范围广，自动化强度高，但价格较贵。
　　三、不溶性微粒的检测
　　1显微计数法
　　①材料和用具：具有高效微粒吸着装置的层流净化台，显微镜，微孔滤膜及其滤器。微孔滤膜为白色，孔径045μm''''直径25mm''''并具有格栅''''膜上如有10μm以上的不溶性微粒，应在5粒以下，并不得有25μm以上的微粒，必要时，可用净化水冲洗使符合要求。本方法所用的净化水应临用新制，用不大于12μm的滤膜滤过，并且每100ml中含10μm以上的不溶性微粒应在10粒以下，使用前经045μm微孔膜滤过。
　　②实验环境：进行微粒检查所处环境应保证不能导入明显的微粒，应在超净室，超净台或符合洁净条件的实验室中进行。
　　③检查前的准备：将层流净化台置清洁的室内，在净化台上将滤器用净化水冲洗至洁净，用镊子夹取测定用滤膜置滤器托架上，固定滤器，倒置反复用净化水冲洗滤器内壁，沥干后安装在抽滤瓶上备用。
　　④检测：取供试品，用水将容量外壁洗净，在净化台上翻转20次使溶液混匀，立即小心开启容器，先倒出供试液少量冲洗开启口，再量供试液25ml，置上述滤器中，静置1分钟，缓缓抽滤至滤膜近干，再用净化水25ml沿壁洗涤并抽滤至滤膜近干，然后用平头镊子将滤膜移置陪氏截片上，微启盖子使滤膜干燥后，将盖子闭合的载片移置显微镜台上，调节好入射光，放大100倍进行显微测量''''调节显微镜使滤膜格栅清晰可见后''''移动坐标轴，分别检测有效过滤面积上最长直径大于10μm的微粒数''''以及大于25μm的微粒数''''分别除以25即得每1ml供试品液中两种类别的微粒数。
　　⑤注意事项
　　a各种形状的微粒应以测到的最长直径计算，重叠微粒和聚合胶体微粒均以单个计算；药物结晶析出不属于检测范围，故不应计算。
　　b必要时可另取净化水25ml，依法操作，一式两份，此项空白试验仅可视作对操作环境的认证，所得数据不必在供试品检查结果中扣除，但对检测结果的正确与否有密切关系，此项试验必须检测全滤膜，得到可信赖数据后方可进行样品检测，如试验结果25ml中含25μm以上微粒超过5粒''''则说明操作环境不佳''''应设法改善。
　　⑥结果判断：
　　a除另有规定外''''每1ml中含有10μm以上的微粒不得过20粒，含25μm以上的微粒不得过2粒。
　　b如1ml中供试品中含10μm以上微粒超过20粒或虽未过20粒''''但其中含25μm以上的微粒超过2粒''''均判为不符合规定。
　　2光阻法
①仪器装置：光阻法使用的仪器通常包括三部分：取样器、传感器，数据处理器。其中传感器为主要部件，它使用的光源为激光或白光光源，由于药典规定检查微粒是10μm和25μm''''故白光光源即可满足要求，激光光源由于它的单色性能更强，应用范围更宽。光阻法对仪器的基本要求是测定范围应包括2～50μm''''浓度范围应不低于0～5000个/ml，既要保证灵敏度，同时也应在一定范围之内呈良好线性关系，如用检查10μm以下微粒则宜采用激光光源。
　　②实验环境：同显微计数法。
　　③检测：样品检测前取滤过水50ml置取样瓶中，开启搅拌至使其均匀，静置待气泡消失后，每次取样不低于5ml，依法测定，读取称定后的平均值，每10ml中含10μm微粒应在10粒以下''''假如超过其范围应重新处理''''合格后方可进行检查。样品检测时，样品处理同显微计数法。先倒入少许样品于取样杯内，冲洗取样杯及搅拌转子，然后倒入样品，倒入样品应高于取样头30ml以上，开启搅拌转子，速度不宜过快，以不产生气泡为宜，静置片刻，按仪器功能键，用样品清洗管道后，取样品仪器将自动检测，并打印出结果，实验结束后，用纯净水清洗仪器，倒掉取样杯中的水。
　　④注意事项：由于光阻法是利用液体在传感器内流动时，以不溶性微粒遮光原理进行微粒检查的，因此本方法不适用于测定混悬剂，胶体溶剂，脂肪乳等易析出结晶的制剂如甘露醇等。
　　⑤结果判断：同显微计数法。